細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

大鼠原代脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持大鼠原代脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含大鼠原代脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用大鼠原代脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

乙酰羧化酶α(ACACα)重組蛋白 Recombinant Acetyl Coenzyme A Carboxylase Alpha (ACACa)

HAVCR1 Protein Human 重組人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

MCAM重組人 CD146 / MCAM 蛋白 Protein

GST Protein Schistosoma japonicum 重組日本血吸蟲 Glutathione S-transferase / GST 蛋白

HA重組甲型流感 H1N1 (A/WSN/1933) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

大鼠轉(zhuǎn)化受體電位陽(yáng)離子通道亞家族M成員4(PM4)試劑盒 ，英文名： PM4 ELISA Kit

Mouse ai myocardial aibody (AMA) ELISA Kit 小鼠抗心肌抗體(AMA)試劑盒

MouseAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit 小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanLDL-ICELISAKit人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物

微管(microtubules)熒光染色試劑盒10次

ELISAKitAb大鼠抗促甲狀腺素受體抗體

兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒   兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒、兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒   兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒、兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒   兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒、兔糖化血紅蛋白A1c 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

兔胎盤生長(zhǎng)因子試劑盒   兔胎盤生長(zhǎng)因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔胎盤生長(zhǎng)因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔胎盤生長(zhǎng)因子試劑盒、兔胎盤生長(zhǎng)因子試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat myeloperoxidase specificity of ai neuophil cytoplasmic aibody IgG (MPO-ANCA IgG)ELISA Kit 大鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)試劑盒

Humanleoopichormone,LHELISAKit (LH)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanClaracellprotein,CC16試劑盒人克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組蛋白脫乙酰化酶(HDAC)總活性比色法定量試劑盒20次

Humaotavirusaigen，RVAgELISAKit人輪狀病毒抗原(RVAg)試劑盒規(guī)格：96T/48T

核孔蛋白188抗體

胎兒阿茲海默病抗原/核小體重塑因子抗體

大鼠原代脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基MCAM重組人 CD146 / MCAM 蛋白 Protein

乙酰羧化酶α(ACACα)重組蛋白 Recombinant Acetyl Coenzyme A Carboxylase Alpha (ACACa)

HA重組甲型流感 H1N1 (A/WSN/1933) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

HAVCR1 Protein Human 重組人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

GST Protein Schistosoma japonicum 重組日本血吸蟲 Glutathione S-transferase / GST 蛋白