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產(chǎn)品中心

當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞原代細(xì)胞支氣管成纖維細(xì)胞
支氣管成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品簡介

支氣管成纖維細(xì)胞的相關(guān)*:體液總脂蛋白膽固醇(Total L-Cholesterol)連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 20次
細(xì)胞培養(yǎng)液總脂蛋白膽固醇(Total L-Cholesterol)連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 20次
血液鋰(lithium)化學(xué)比色法定量檢測試劑盒 50次
組織鋰(lithium)化學(xué)比色法定量檢測試劑盒 50次
土壤鋰(lithium)化學(xué)比色法定量檢測

產(chǎn)品廠地:上海市
更新時(shí)間:2025-02-21
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:417
詳細(xì)介紹在線留言
品牌其他品牌貨號(hào)GOY-01X0745
規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產(chǎn)品屬性:  

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

支氣管成纖維細(xì)胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0745

商品介紹:

名稱    支氣管成纖維細(xì)胞  

2.組織來源:支氣管組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介:

支氣管成纖維細(xì)胞分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),是指由氣管分出的各級(jí)分枝,由氣管分出的一級(jí)支氣管,即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較,前者較細(xì)長,走向傾斜;后者較粗短,走向較前者略直,所以經(jīng)氣管墮入的異物多進(jìn)入右主支氣管。支氣管和氣管還有以區(qū)別就是,氣管是以“C"型的氣管軟骨為支架,而支氣管不是。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的支氣管成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁*,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。支氣管成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括:構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài),合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的人支氣管成纖維細(xì)胞采用膠原酶-胰酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的人支氣管成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產(chǎn)品貨號(hào)CM-H015

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

傳代特性可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 CCL27 基因全長ORF克隆

 CDK2 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆

 AIMP1 / SCYE1 基因全長ORF克隆

 CXCL13 基因全長ORF克隆

 TNFRSF17 基因全長ORF克隆

 HTRA2 基因全長ORF克隆

 CCL28 基因全長ORF克隆

 XPC 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆

 CXCL6 基因全長ORF克隆

 TNFSF13 基因全長ORF克隆

支氣管成纖維細(xì)胞0.156-10 ng/mL 人泛素激活(NEDD8-activating enzyme E1 catalytic subunit)ELISA試劑盒

0.312-20 ng/mL 人卷曲蛋白4(Fz-4)ELISA試劑盒

1.56-100 U/mL 人水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒

NS培養(yǎng)基 英文名稱:NS Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

31.2-2000 pg/mL 人細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS-3)ELISA試劑盒

1.56-100 ng/mL 人MFSD2A ELISA試劑盒

78-5000 pg/mL 人5-羥色胺受體1B(5-HT1B)ELISA試劑盒

亞利桑那菌瓊脂(SA) 英文名稱:Salmonella Arizona Agar 產(chǎn)品規(guī)格:100

0.156-10 ng/mL 人血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒

1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Cell surface A33 antigen

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