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當前位置:首頁技術文章小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸elisa檢測試劑盒?操作步驟

小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸elisa檢測試劑盒?操作步驟

更新時間:2021-11-02點擊次數:567

小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸elisa檢測試劑盒操作步驟:


1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘。

小鼠CXCR4(mouse CXCR-4)

小鼠皮質酮(mouse Corticosterone)

小鼠環氧化酶-2 (mouse COX-2)

小鼠結締組織生長因子(mouse CTGF)

小鼠細胞毒性T淋巴細胞相關抗原4 (mouse CTLA-4)

小鼠細胞色素P450(mouse Cytochrome P450)

小鼠C反應蛋白(mouse CRP)

小鼠CXC趨化因子受體3(mouse CXCR3)

小鼠CXC趨化因子配體16(mouse CXCL16)

小鼠CXCL1/KC(mouse KC)

小鼠環磷酸腺苷(mouse cAMP)

小鼠環磷酸鳥苷(mouse cGMP)

小鼠睫狀神經營養因子(mouse CNTF)

小鼠可溶性CD36分子(mouse sCD36)

小鼠sCD40配體(mouse sCD40 Ligand)

小鼠CD34(mouse CD34)

小鼠可溶性白細胞分化抗原40配體(mouse sCD40L)

小鼠補體C3a(mouse C3a)

小鼠補體C5a(mouse C5a)

小鼠血清總補體(mouse CH50)

小鼠肌酸激酶(mouse CK)

小鼠肌酸激酶同工酶(mouse CK-MB)

小鼠羥甲基賴氨酸(mouse CML)

小鼠C-肽(mouse C-peptide)

小鼠心肌鈣蛋白T(mouse cTnT)

小鼠粒細胞集落刺激因子(mouse G-CSF)

小鼠粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(mouse GM-CSF)

小鼠巨噬細胞集落刺激因子(mouse M-CSF)

小鼠細胞色素C(mouse Cytochrome C)

小鼠雙鏈DNA(mouse dsDNA)

小鼠多巴胺(mouse Dopamine)


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